MÉTODO DIRECTO: FROTIS

FUNDAMENTO:

Este método sólo sirve para evidenciar la presencia de un determinado parásito, y se trata de un método cuantitativo que no permite conocer el número de formas larvarias que hay por cada gramo de heces y por lo tanto la carga parasitaria.

FROTIS FRESCO:

Es un método rápido pero poco seguro. Tiene posibilidad de falsos negativos, por lo que es necesario repartir. Permite observar la motilidad de los microorganismos. Amiba y otros flagelos. Detecta quiste y huevos de helmintos. Precisa una concentración.

MUESTRA BIOLOGICA:

Heces fecales frescas

                         MATERIAL                                                                                                      SUSTANCIAS

·         Portaobjetos                                                                                                   Sol. Fisiológica al 0.9%

·         Cubreobjetos                                                                                                  Sol. de Yodo

·         Pipetas Pauster

·         Vaso de precipitado

·         Microscopio

A PROCEDIMIENTO

1.   Sobre un portaobjetos bien limpio se coloca una pequeña porción de materia fecal, con  un palillo, tratando que al sacar con este instrumento y al aplicarlo se haga una delgada y fina capa para que se pueda ver bien el microscopio.

2.   Se le agrega una gota de Sol. Fisiológica.

3.   Se coloca el cubreobjetos, verticalmente, dejando que una parte se extienda dejándola caer.

4.   Se observa sin teñir.

5.   En otro portaobjetos limpio se repide el mismo procedimiento pero ahora se tiñe con la Tinción de Yodo.

Es importante que los frotis no sean densos, sino transparentes. Y que se haga las observaciones con diferentes muestras.

Tras la observación de trofozoitos se utiliza la Tinción de Yodo que tiñe Quistes y destaca sus detalles(Los trofozoitos mueren y resultan inidentificables).

L a observación se hace siempre con el objetivo Seco Débil (10x)y con poca luz: al encontrarse estructuras sospechosas, se observa con el Objeto Seco Fuerte(40x).

OBSERVACIONES                         

FROTIS CON SOLUCION SALINA

                                                      Se coloco en el frotis una muestra fresca de heces fecales, con una gota de la solución salina, para que se pusiera en el microscopio y poder observarla. Enfocando  primero con el objetivo general (el más pequeño de todos) para ver que se está observado en esta muestra.

  

                                             Con él  foque 10x o seco débil se observo, pequeñas masas, un poco negras, pero no eran interesantes porque eran restos de un poco de comida del paciente, se vio a las 9 un semicírculo, obscuro, se penso que este era algún quiste pero no era así.

Nosotros lo enfocamos a 40x o a seco fuerte, para verlo mejor,  pero se nos aclaro la duda si este era un quiste o no por la simple razón,  que un quiste se lograríamos visualizar, el contenido célula pero este nada se le veía en el centro por eso llegamos a la conclusión que eran células de almidones  y grasas.  

        FROTIS CON YODO

El siguiente Frotis se realizar usando la misma metodología de  aplicación de las heces fecales, utilizando un aplicador, y esparciendo la muestra. Pero en lugar de colocarle solución salina nosotros le colocamos y yodo para que se pudieran ver los quistes parasitarios.

Se enfoco con el objetivo general para ver cualquier anomalía, quiste o trofozoito de cualquier parasito. Cuando se movió hacia la izquierda  se descubrió una estructura extraña, pero aun sin quistes porque gracias al químico se colorea de otro color, la pared celular  para poder ser conocible el trofozoito.

Se observo en objetivo 10x, esta  estructura con la finalidad de verla más   afondo se descubrió una estructura como de tabiques, pero diminuta, era una espiral celulosa derivada de algún alimento vegetal del paciente.

CONCLUSIÓN

Los trofozoitos y quiste de los protozoos tienen forma de lentey son transparentes, por lo que suelen brillar y se ven mejor en el campo del microscopio que otros objetos de tamaño similar. Para identificar los protozoos suele ser teñidos. La tinción mas ocupada el la de yodo(solución  acuosa de yoduro de potasio al 1% saturada con cristales de yodo),los únicos que se alcanzan a ver sin tinción son los helmintos y sus huevecillos, paro el examen de las larvas puede ser mas útil la tinción de yodo, ya que los inmoviliza y destruye, y tiñe diferencialmente algunas partes.No obstante la tinción de las larvas debe hacerse con poco contraste, ya que es frecuentemente el exceso de tinción.